智能細胞株篩選系統有什么好處?
點擊次數:890 更新時間:2023-01-18
智能細胞株篩選系統主要是用來篩選那些不表達特定蛋白的細胞株,這個系統需要專門的培養皿,在使用中如果沒有合適的培養液,培養過程就會出現很多的問題。我們可以用液氮作為培養液,但是液氮需要冷凍,保存溫度不能太低也不能太高。如果使用-80度左右就可以了。
將培養中的單個或多個細胞懸浮于無菌液體中形成懸浮液,加入生長因子和抗菌藥物后進行培養。待生長因子濃度達到一定程度后,我們將其進行離心分離。然后在液氮中進行冷凍干燥后保存:(-80度)-30min使用智能細胞株篩選系統來篩選細胞株。其中一些細胞株可以在培養液中穩定生長過一年!
1、用于誘導表達:將經過誘導的細胞用含有藥物的培養液和含有其它不同類型藥物的培養液連續培養7天以上,然后收集所有細胞進行計數(以單克隆或群體計數)。
2、用于分泌蛋白篩選:將通過誘導培養獲得的可在血清中穩定表達目的蛋白或mRNA的細胞分離提取純化得到抗體后分離,然后用含有抗菌藥物L-巖藻糖苷酸(LTA)和其它各種不同抗菌藥物成分濃度為500μg/ml、30000μg/ml和30000nM的處理后進行離心得到粗蛋白(>20kDa)后離心提取總蛋白表達分析,篩選可表達目的蛋白或mRNA。
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